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    組氨酸的測定方法

    發(fā)布時間: 2022-01-14  點擊次數(shù): 704次
       組氨酸是一種α-氨基酸,化學式為C6H9N3O2,分子量為155。組氨酸在1896年由德國物理學家艾布瑞契·科塞爾首次分離出來。在營養(yǎng)學的范疇里,組氨酸被認為是一種人類必需氨基酸,主要是對兒童。在成年之后,人類開始可以自己合成組氨酸。在慢性尿毒癥患者的膳食中添加少量的組氨酸,氨基酸結合進入血紅蛋白的速度增加,腎原性貧血減輕,所以組氨酸也是尿毒癥患者的必需氨基酸。在組氨酸脫羧酶的作用下,組氨酸脫羧形成組胺。組胺具有很強的血管舒張作用,并與多種變態(tài)反應及炎癥有關。此外,組胺會刺激胃蛋白酶與胃酸。
      方法名稱:組氨酸的測定—電位滴定法。
      應用范圍:本方法采用滴定法測定組胺酸的含量。
      本方法適用于組胺酸。
      方法原理:供試品加無水甲酸溶解,再加冰醋酸,照電位滴定法,用高氯酸滴定液滴定。讀出高氯酸滴定液使用量,計算組胺酸的量。
      試劑:
      1.水(新沸放置至室溫)
      2.高氯酸滴定液(0.1mol/L)
      3.無水甲酸
      4.冰醋酸
      5.醋酐
      6.結晶紫指示液
      7.基準鄰苯二甲酸氫鉀
      儀器設備:
      試樣制備:1.高氯酸滴定液(0.1mol/L)
      配制:取無水冰醋酸(按含水量計算,每1g水加醋酐5.22mL)750mL,加入高氯酸(70%-72%)8.5mL,搖勻,在室溫下緩緩滴加醋酐23mL,邊加邊搖,加完后再振搖均勻,放冷,加無水冰醋酸適量使成1000mL,搖勻,放置24小時。若所測供試品易乙酰化,則須用水份測定法測定本頁的含水量,再用水和醋酐調節(jié)至本液的含水量為0.01%-0.2%。
      標定:取在105℃干燥至恒重的基準鄰苯二甲酸氫鉀約0.16g,精密稱定,加無水冰醋酸20mL使溶解,加結晶紫指示液1滴,用本液緩緩滴定至藍色,并將滴定的結果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于20.42mg的鄰苯二甲酸氫鉀。根據(jù)本液的消耗量與鄰苯二甲酸氫鉀的取用量,算出本液的濃度,即可。
      貯藏:置棕色玻璃瓶中,密閉保存。
      2.結晶紫指示液
      取結晶紫0.5g,加冰醋酸100mL使溶解,即得。
      操作步驟:精密稱取供試品0.15g,加無水甲酸1002mL使溶解,加冰醋酸50mL,照電位滴定法用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并將滴定的結果用空白試驗校正。記錄消耗氫氧化鈉滴定液的體積數(shù)(mL),每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于15.52mg的組胺酸(C6H9N3O2)。
      注1:“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一,“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。